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Fluorescência no local hibridização (FISH) é uma das várias técnicas usadas para pesquisar o DNA de suas células, procurando a presença ou ausência de genes específicos ou porções de genes.Muitos tipos diferentes de câncer estão associados a anormalidades genéticas conhecidas. E por genética, não estamos falando apenas sobre hereditariedade. Ao longo da vida, as células podem cometer erros ao se dividir e crescer. Mutações no DNA associadas ao câncer podem se acumular nessas células.
Como funciona
FISH é uma técnica que usa sondas fluorescentes para detectar genes específicos ou partes de genes (sequências de DNA). O pessoal do laboratório do centro médico e oncologistas usam o FISH para ajudar a avaliar os pacientes que podem ter câncer e, às vezes, para monitorar um paciente que já foi diagnosticado com câncer e tratado.
FISH pode ser feito usando vários tipos de amostras de acordo com a localização e o tipo de câncer suspeito: células tumorais obtidas de sangue periférico, de uma biópsia de medula óssea ou de uma biópsia de linfonodo e tecido fixado em formalina e embebido em parafina (isto se refere a uma amostra de tecido que é processada em laboratório e incorporada em um tipo de cera, tornando-a mais rígida, de modo que pode ser fatiada em seções finas e montada para visualização ao microscópio).
O que as letras significam
O “H” em FISH refere-se à hibridização. Na hibridização molecular, uma sequência de DNA ou RNA marcada é usada como uma sonda - visualize um tijolo vermelho de Lego, se quiser. A sonda é usada para encontrar um bloco de Lego correspondente, ou sequência de DNA, em uma amostra biológica.
O DNA em seu espécime é como pilhas de tijolos de Lego, e a maioria dos tijolos nessas pilhas não corresponderá à nossa sonda vermelha. E todos os seus tijolos são organizados ordenadamente em 23 pares de pilhas de tijolos - cada pilha é um dos seus pares de cromossomos homólogos, mais ou menos. Ao contrário dos blocos de Lego, nossa sonda de Lego vermelha é como um ímã forte e encontra seu par sem ter que vasculhar as pilhas.
O “F” refere-se à fluorescência. Nossa sonda vermelha pode se perder nas pilhas de tijolos, por isso é marcada com um corante fluorescente colorido para que brilhe. Quando encontra seu par entre as 23 pilhas emparelhadas, uma etiqueta fluorescente revela sua localização. Então, agora você pode ver como os pesquisadores e médicos podem usar o FISH para ajudar a identificar onde (qual pilha ou qual cromossomo) um determinado gene está localizado para um determinado indivíduo.
O “I” e o “S” representam no local. Isso se refere ao fato de que nosso tijolo vermelho de Lego está procurando seu par dentro da amostra que você deu.
FISH e cânceres de sangue específicos
FISH e outros no local os procedimentos de hibridização são usados para diagnosticar uma variedade de anormalidades cromossômicas - mudanças no material genético, mudanças nos cromossomos, incluindo o seguinte:
- Exclusão: parte de um cromossomo se foi
- Translocação: parte de um cromossomo se quebra e adere a outro cromossomo
- Inversão: parte de um cromossomo se quebra e reinsere, mas na ordem inversa
- Duplicação: parte de um cromossomo está presente em muitas cópias dentro da célula
Cada tipo de câncer pode ter seu próprio conjunto de alterações cromossômicas e sondas relevantes. O FISH não apenas ajuda a identificar as mudanças genéticas iniciais em um processo de doença como o câncer, mas também pode ser usado para monitorar a resposta à terapia e a remissão da doença.
As alterações genéticas detectadas por FISH às vezes oferecem informações adicionais sobre como o câncer de um indivíduo provavelmente se comportará, com base no que foi observado no passado em pessoas com o mesmo tipo de câncer e alterações genéticas semelhantes. Às vezes, o FISH é usado após o diagnóstico já ter sido feito, para colher informações adicionais que podem ajudar a prever o resultado do paciente ou o melhor tratamento.
O FISH pode identificar anormalidades cromossômicas em leucemias, incluindo na leucemia linfocítica crônica (LLC). Para leucemia linfocítica crônica / linfoma linfocítico pequeno, o FISH permite que os pacientes descubram sua categoria de prognóstico: bom, intermediário ou ruim. Na leucemia linfoblástica aguda (LLA), a genética das células leucêmicas pode informar sobre o nível de risco de câncer e ajudar a orientar as decisões terapêuticas.
Painéis de FISH também estão disponíveis para linfoma, mieloma múltiplo, distúrbios proliferativos de células plasmáticas e síndrome mielodisplásica. No caso de linfoma de células do manto, por exemplo, há um translocação que o FISH pode detectar o chamado GH / CCND1 t (11; 14) que está freqüentemente associado a este linfoma.
Por que FISH?
Uma vantagem do FISH é que ele não precisa ser realizado em células que estão se dividindo ativamente. O teste citogenético geralmente leva cerca de três semanas, porque as células cancerosas devem crescer em placas de laboratório por cerca de 2 semanas antes de serem testadas. Em contraste, os resultados de FISH geralmente estão disponíveis no laboratório em alguns dias.